ВФК:Методи

(Difference between revisions)

Jump to: navigation, search

Revision as of 15:44, 13 October 2025

Історична довідка	Структура відділу	Захищені дисертації	Державні премії	Премії і стипендії молодим вченим	Публікації	Державні патенти України	Участь у програмах	Методи	Досягнення

У відділі впроваджено низку сучасних експериментальних підходів, спрямованих на вивчення механізмів функціонування серця та судин у нормі, при старінні й за умов різних патологічних процесів, що супроводжується комплексним аналізом змін на системному, клітинному й субклітинному рівнях. Наші зусилля спрямовані на розвиток експериментальної кардіології та доклінічних досліджень препаратів, сполук, нових потенційно лікувальних засобів тощо. Сучасна методична база дає змогу проводити оцінку кардіо- та вазопротекторної дії нових сполук, досліджувати редокс-гомеостаз, біоенергетику клітин, експресію генів, а також моделювати основні патологічні стани у тварин (ішемія-реперфузія міокарда, цукровий діабет, артеріальна гіпертензія, хворобі Паркінсона, гостра серцева недостатність тощо).

In vivo моделі: Модель гострого інфаркту міокарда з оцінкою функціонального стану серця за допомогою мікрокатетерного методу та ЕКГ. Модель гострого ураження серця, викликаного дією кардіотоксичного агентів.

Ex vivo моделі:

Ізольоване серце, перфузоване за методом Лангендорфа: моделювання ішемії-реперфузії, ішемічного прекондиціювання; аналіз механізму Франка-Старлінга; вплив гіпертермії; оцінка кардіодинаміки та ефективності використання кисню міокардом.

Міографія:

Вивчення регуляції судинного тонусу та оцінка ендотеліальної дисфункції препаратів ізольованих судин.

In vitro дослідження:

Функціональні характеристики мітохондрій:

Робота електрон-транспортного ланцюга органел, мембранний потенціал, кальцієва ємність, чутливість мітохондріальних мембран (mPTP opening) до дії стресових факторів; транспорт йонів кальцію (Fluo 4).

Біохімічні та молекулярно-генетичні методи: визначення маркерів оксисного та нітрозативного стресу, активність ферментів синтезу/утилізації NO та H₂S, вміст глутатіону, клініко-релевантних маркерів пошкодження тканин, дослідження експресії генів за допомогою ПЛР у реальному часі (qPCR).

У відділі фізіології кровообігу є необхідна для виконання НДР матеріально-технічна база, обладнання та устаткування:

1) спектрофотометр Shimadzu UV-1900i;

2) прилад “Oxygraph+” («Hansatechinstruments», Великобританія) для дослідження процесів мітохондріального дихання полярографічним методом з використанням закритого електроду Кларка;

3) рН-метр РР-25 «Sartorius» (Німеччина)для дослідження мітохондріального потенціалу;

4) система з електродом ArrowH2S™ (ShelfsciScientific) для вимірювання концентрації H2S у мітохондріях та тканинах серця щурів (придбана за кошти НФДУ);

5) мікропланшетний зчитувач BiosanHiPo MPP-96 (Литва) для визначення вмісту редукованого та окисленого глутатіону у гомогенатах серця та інших показників;

6) напівавтоматичний біохімічний аналізатор Biochem SA (HighTechnologyInc., США), призначений для оцінки вмісту різних біохімічних кардіомаркерів;

7) лабораторний рН-метр/іономерSevenDirect SD50-Kit в комплекті з комбінованим рН-електродом InLabMicroPro ISM та EasyMixдля контролю рН проб під час біохімічних і фізіологічних досліджень;

8) центрифуга лабораторна MICROmed СМ-3МТ, центрифуга з охолодженням Allegro(США);

9) установка для перфузії ізольованого серця за Лангендорфом при постійному тиску для дослідження показників скорочувальної функції ізольованого серця щурів.

У розпорядженні співробітників відділу також є сучасна молекулярно-генетична лабораторія Центру колективного користування, яка оснащена системою для проведення полімеразної ланцюгової реакції 7500 FastReal-Time PCR (AppliedBiosystems) та спектрофотометр ND1000 (NanoDrop Technologies Inc., США) для визначення концентрації тотальної РНК, обладнання для виділення РНК (шейкери, центрифуги).

ВФК:Методи

Revision as of 15:44, 13 October 2025

National Academy of Sciences of Ukraine

Інститут фізіології ім. О. О. Богомольця

Personal tools

Navigation

societies

additional

Search

Views

Namespaces

Variants

Toolbox

Actions

@@ Line 1: / Line 1: @@
 {{ВФК}}
-'''Основні методичні прийоми, що використовуються у відділі:'''
+У відділі впроваджено низку сучасних експериментальних підходів, спрямованих на вивчення механізмів функціонування серця та судин у нормі, при старінні й за умов різних патологічних процесів, що супроводжується комплексним аналізом змін на системному, клітинному й субклітинному рівнях. Наші зусилля спрямовані на розвиток експериментальної кардіології та доклінічних досліджень препаратів, сполук, нових потенційно лікувальних засобів тощо. Сучасна методична база дає змогу проводити оцінку кардіо- та вазопротекторної дії нових сполук, досліджувати редокс-гомеостаз, біоенергетику клітин, експресію генів, а також моделювати основні патологічні стани у тварин (ішемія-реперфузія міокарда, цукровий діабет, артеріальна гіпертензія, хворобі Паркінсона, гостра серцева недостатність тощо).
-Дослідження виконуються на цілій тварині, ізольованих сегментах судин і ізольованому серці щурів, а також на ендотелії і ізольованих мітохондріях серця щурів.
+'''In vivo моделі: '''
+Модель гострого інфаркту міокарда з оцінкою функціонального стану серця за допомогою мікрокатетерного методу та ЕКГ. Модель гострого ураження серця, викликаного дією кардіотоксичного агентів.
-В процесі виконання роботи використовуються наступні методи:
+'''Ex vivo моделі:'''
-*'''''фізіологічні:''''' реєстрація показників кардіогемодинаміки у щурів; ретроградна перфузія коронарних судин за методом Лангендорфа, реєстрація напруги кисню у розчинах, реєстрація активних міогенних реакцій гладеньких м’язів ізольованих судинних препаратів, реєстрація електричних реакцій ендотелію судин, ін’єкції речовин в популяції нейронів мозку згідно стереотаксичних координат;
+Ізольоване серце, перфузоване за методом Лангендорфа: моделювання ішемії-реперфузії, ішемічного прекондиціювання; аналіз механізму Франка-Старлінга; вплив гіпертермії; оцінка кардіодинаміки та ефективності використання кисню міокардом.
-*'''''біофізичні''''': реєстрація мембранного потенціалу ендотеліальних клітин (культивованих і інтактних) методом перфорованого петч клемп в режимі фіксації струму;
+'''Міографія:'''
-*'''''біохімічні''''': визначення вмісту сірководню, активність ферментів синтезу сірководню, активності синтаз оксиду азоту (нейрональної, ендотеліальної і індуцибельної), нітратредуктази, нітрозотіолів, показників оксидативного і нітрозативного стресу -пероксиду водню, супероксидного радикалу, гідроксильного радикалу, дієнових кон’югатів, малонового діальдегіда у гомогенатах серця, аорти, довгастого мозку і суспензії мітохондрій, дослідження процесів мітохондріального дихання та окисного фосфорилювання мітохондрій серця щурів, виділення мітохондрій з серця щурів, спектрофотометрична реєстрація набухання мітохондрій і вивільнення мітохондріального фактора;
+Вивчення регуляції судинного тонусу та оцінка ендотеліальної дисфункції препаратів ізольованих судин.
-*'''''молекулярні''''': метод полімеразно ланцюгової реакції у реальному часі; Western-blot аналіз для визначення рівнів експресії роз’єднувальних білків (UCP2 і UCP 3) у мітохондріях серця
+'''In vitro дослідження:'''
-*'''''моделювання:''''' модель хвороби Паркінсона, експериментальний цукровий діабет у щурів.
+'''Функціональні характеристики мітохондрій:'''
+Робота електрон-транспортного ланцюга органел, мембранний потенціал, кальцієва ємність, чутливість мітохондріальних мембран (mPTP opening) до дії стресових факторів; транспорт йонів кальцію (Fluo 4).
+Біохімічні та молекулярно-генетичні методи: визначення маркерів оксисного та нітрозативного стресу, активність ферментів синтезу/утилізації NO та H₂S, вміст глутатіону, клініко-релевантних маркерів пошкодження тканин, дослідження експресії генів за допомогою ПЛР у реальному часі (qPCR).
+У відділі фізіології кровообігу є необхідна для виконання НДР матеріально-технічна база, обладнання та устаткування:
+) спектрофотометр Shimadzu UV-1900i;
+) прилад “Oxygraph+” («Hansatechinstruments», Великобританія) для дослідження процесів мітохондріального дихання полярографічним методом з використанням закритого електроду Кларка;
+) рН-метр РР-25 «Sartorius» (Німеччина)для дослідження мітохондріального потенціалу;
+) система з електродом ArrowH2S™ (ShelfsciScientific) для вимірювання концентрації H2S у мітохондріях та тканинах серця щурів (придбана за кошти НФДУ);
+) мікропланшетний зчитувач BiosanHiPo MPP-96 (Литва) для визначення вмісту редукованого та окисленого глутатіону у гомогенатах серця та інших показників;
+) напівавтоматичний біохімічний аналізатор Biochem SA (HighTechnologyInc., США), призначений для оцінки  вмісту різних біохімічних кардіомаркерів;
+) лабораторний рН-метр/іономерSevenDirect SD50-Kit в комплекті з комбінованим рН-електродом InLabMicroPro ISM та EasyMixдля контролю рН проб під час біохімічних і фізіологічних досліджень;
+) центрифуга лабораторна MICROmed СМ-3МТ, центрифуга з охолодженням Allegro(США);
+) установка для перфузії ізольованого серця за Лангендорфом при постійному тиску для дослідження показників скорочувальної функції ізольованого серця щурів.
+У розпорядженні співробітників відділу також є сучасна молекулярно-генетична лабораторія Центру колективного користування, яка оснащена системою для проведення полімеразної ланцюгової реакції 7500 FastReal-Time PCR
+(AppliedBiosystems) та спектрофотометр ND1000 (NanoDrop Technologies Inc., США) для визначення концентрації тотальної РНК, обладнання для виділення РНК (шейкери, центрифуги).