Відділ фізіології нейронних мереж:3

Методи досліджень

---

Метод 1

Культивування з низькою щільністю дисоційованих нейронів периферичних та центральних відділів нервової системи щурів. Використання первинних культур і нейронів спінальних гангліїв, верхніх шийних та тригіменальних гангліїв (Telka, Rikhalsky, Veselovsky, 2019).

Метод 2

Сумісне культивування дисоційованих гангліозних клітин сітківки ока та нейронів superficial superior colliculus (SSC) щурів лінії Wistar. Сумісне культивування дисоційованих нейронів спінальних гангліїв (DRG) та нейронів дорсального рогу (DH) спинного мозку з утворенням функціональних синаптичних зв’язків.

Метод 3

Електрофізіологічні дослідження синаптичної передачи методом “patch-clamp” в конфігурації “ціла клітина” в режимах фіксації потенціалу або струму з використанням методу позаклітинної стимуляції поодинокого аксона пресинаптичного нейрона або поодинокої пресинаптичної терміналі.

Метод 4

Електрофізіологічні дослідження синаптичної передачі методом парної реєстрації (pair-recording) одночасно в двох синаптично зв’язаних нейронах шляхом стимуляції соми пресинаптичного нейрону та одночасної реєстрації постсинаптичних струмів другого нейрону (Pfrieger, Veselovsky et al, 1992).

Метод 5

Методи швидкої локальної суперфузії (Veselovsky et al., 1996) та швидкої потокової перфузії для аплікації фармакологічних речовин in vitro під час електрофізіологічного дослідження.

Застосування in vitro експериментальних моделей патологічних станів в електофізіологічних дослідженнях: штучної гіпоінсулінемії, гіперглікемії та гіпоксії згідно з авторськими методиками, які були описані раніше (Dumanska & Veselovsky, 2019; Shypshyna et al., 2021) та методів ексайтотоксичного пошкодження нейронів.

Метод 6

Методи реєстрації змін концентрації внутрішнього незв’язаного [Ca2+]i та одночасного вимірювання викликаних постсинаптичних струмів у поодиноких синапсах нейронів ЦНС (Fedulova & Veselovsky, 2004). Методи аналізу квантового вивільнення нейромедіаторів в синапсах культивованих нейронів центральної та периферичної нервових систем щурів.

Метод 7

Метод досліджень електрофізіологічних властивостей гангліозних клітин цілісної сітківки, що дозволяє зберігати максимально інтактними внутрішньоклітинні структури і клітинні регуляторні механізми в нормальних умовах та в умовах експериментального діабету.

Метод 8

Метод мікрофлуорометричної реєстраціі змін внутрішньоклітинної концентрації вільних іонів кальцію в цитозолі гангліозних клітин цілісної сітківки під час функціональної активності клітини або під впливом різних молекулярних субстанцій (Kuznetsov et al., 2012).

Метод імуноцитохімічного аналізу експресії певних білків нейрону після вимірювання струмів соматичної мембрани для ідентифікації його нейромедіаторного фенотипу в клітинній культурі (Grigorov еt al., 2014).

Метод 9

Метод полімеразної ланцюгової реакції із зворотньою транскрипцією для виявлення експресії генів певних субодиниць іоних каналів в цілому гіпокампі, в культурі нейронів гіпокампа і в поодиноких інтернейронах культури клітин гіпокампа та гангліозних клітинах сітківки (Grigorov еt al., 2014).

Метод відведення потенціалів дії нейронів гангліїв /сплетінь автономної нервової системи з використанням методів ортодромної та антидромної електричної стимуляції нервів ганглія або іонофоретичної аплікації збуджувального нейромедіатора безпосередньо на сому нейрона ганглія (Nastenko et al., 2022, 2024).